up主要考研了,最近在看一些实验上的资料,主要是生化实验器材方面,由于我自己是边学边总结,肯定不能和在实验室的师兄师姐们相比,难免会有遗漏和错误,希望与大家相互查漏补缺。
主要参考有中国农大的慕课、南京农大的慕课,百度百科、丁香园、维基百科等
这一篇会概括的讲一讲移液枪,后面会有一篇更详细深入但侧重点不同
生物实验中转移大量液体,一般是简单粗暴的倾倒;定量移液时需要用到烧杯、量筒、容量瓶等;而实验室最常见的是小量移液。
2000年刚开始的时候,生物实验室小量移液还都普遍采用移液管来进行,现在实验室里移液管操作的场景已经很少了,大多都是使用移液枪进行操作。
常见移液枪
移液枪 (英语:pipette, pipet, pipettor 或 chemical dropper) 是移液器的一种,常用于实验室少量或微量液体的移取,规格不同,不同规格的移液枪配套使用不同大小的枪头,不同生产厂家生产的形状也略有不同,但工作原理及操作方法基本一致。移液枪属精密仪器,使用及存放时均要小心谨慎,防止损坏,避免影响其量程。
移液枪分为微量加样器、多通道加样器、电子和分配器
这张图片百科上找到的,我也没见过多通道和电子的移液枪相比于滴管,移液枪具有微量、手动、可调节的特点,并且也不会出现换液体就频繁洗涤的优势,减少了溶液之间污染的风险。
移液枪枪头移液枪的原理
压出空气-->入液回弹吸液-->压出液体
量程的调节
在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,顺时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先逆时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度(原因在于移液枪内的弹簧恢复时无法达到理想的弹性形变)。
在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
枪头的装配
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,一是会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住;二是会容易用力不均匀,枪头套入角度不对,导致漏气。
正确的方法是将移液枪垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
图片来自中国农大慕课截图,侵删
移液的方法
移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)
具体步骤如下
设置体积,旋转旋钮到所需位置
按下按钮到第一停点,打出空气,将吸头垂直深入溶液,缓慢松开按钮(啰嗦一下停点,如果自己上手操作的话,很容易感受到按按钮过程中有两个停顿的地方,就是此处所说的停点)
贴壁打出溶液,匀速按下按钮到第二停点
图片来自中国农大慕课截图,侵删
移液器放置
使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
关于消毒
枪头有专门的盒子,用报纸包住盒子,放入高压灭菌锅进行消毒
移液枪消毒则需要看具体厂商和型号,有的移液枪可以进行高压灭菌,有的不可以,不能高压灭菌的移液枪可以按照说明书上的装配方法,拆开使用酒精或其他灭菌试剂擦拭灭菌
注意事项
如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物;
移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,且将移液器垂直放置在移液器架上;
避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准;
发现问题及时找专业人员处理;
当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;
正确使用移液器吸液、排液,以达高精准度;
平时检查是否漏液的方法:吸液后在液体中停1-3秒观察吸头内液面是否下降;如果液面下降首先检查吸头是否有问题,如有问题更换吸头,更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题,应找专业维修人员修理。
需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理
(第一次投专栏,有错误请大家指正)